Mauruuru koe mo te toro ki Nature.com. He iti te tautoko CSS te putanga tirotiro e whakamahia ana e koe. Mo te wheako pai rawa atu, e taunaki ana matou me whakamahi koe i tetahi kaitirotiro kua whakahoutia (me monohia ranei te Aratau Hototahi ki Internet Explorer). I tenei wa, hei whakarite i te tautoko tonu, ka tukuna e matou te waahi kaore he momo me te JavaScript.
Ko te Thermophiles he microorganisms e tipu ana i te wera nui. Ma te ako i a raatau ka taea te whakarato korero nui mo te ahuatanga o te ao ki nga ahuatanga tino kino. Heoi, he uaua ki te whakatutuki i nga ahuatanga o te pāmahana teitei me nga karu whatu tikanga. He maha nga rongoa i hangaia i te kaainga i runga i te whakamahana hiko parenga o te rohe kua whakaarohia, engari kaore he otinga arumoni ngawari. I roto i tenei pepa, ka whakauruhia e matou te ariā o te whakamahana laser microscale i runga i te waahi tirohanga ki te whakarato i nga pāmahana teitei mo nga rangahau thermophile me te pupuri i te taiao o te kaiwhakamahi. Ko te whakamahana moroiti i te kaha taiaho ngawari ka taea te whakatutuki ma te whakamahi i te taputapu whakakikorua nanoparticle koura hei kaihoroi maamaa me te pai. Ka matapakihia nga paanga pea o te hurihanga wai moroiti, te pupuri pūtau, me te nekehanga thermophoretic centrifugal. Kua whakaatuhia te tikanga i roto i nga momo e rua: (i) Geobacillus stearothermophilus, he huakita thermophilic kaha e whakaputa uri ana i te 65°C, kua kite matou ka tipu, ka tupu me te kauhoe i raro i te whakamahana moroiti; (ii) Thiobacillus sp., he archaea hyperthermophilic tino pai. i te 80°C. Ma tenei mahi e para te huarahi mo te mataki ngawari me te haumaru o nga microorganisms thermophilic ma te whakamahi i nga taputapu miihini hou me te utu utu.
I roto i nga piriona tau, kua huri te ora i runga i te whenua ki te urutau ki te whānuitanga o nga ahuatanga taiao e kiia ana he tino kino i etahi wa mai i to tatou tirohanga tangata. Ina koa, ko etahi o nga microorganisms thermophilic (huakita, archaea, harore) e kiia nei ko te thermophiles ka tipu i roto i te awhe mahana mai i te 45°C ki te 122°C1, 2, 3, 4. Ka noho nga Thermophile ki roto i nga momo rauwiringa kaiao, penei i nga hau waiariki o te moana hohonu, nga puna wera. nga waahi puia ranei. Ko ta raatau rangahau he nui te hiahia i roto i nga tekau tau kua hipa mo nga take e rua neke atu. Tuatahi, ka taea e tatou te ako mai i a raatau, hei tauira, he pehea te noho pumau o te thermophiles 5, 6, te enzymes 7, 8 me te kiriuhi 9 i nga wera nui, me pehea ranei e taea ai e te thermophiles te tu atu i nga taumata tino nui o te radiation10. Tuarua, ko ratou te turanga mo te maha o nga tono hangarau koiora nui1,11,12 penei i te hanga wahie13,14,15,16, te whakahiato matū (dihydro, waipiro, mewaro, waikawa amino, me etahi atu)17, biomining18 and thermostable biocatalysts7 ,11, 13. Otirā, ko te tauhohenga mekameka polymerase (PCR)19 e mohiotia ana i tenei wa ka uru ki tetahi enzyme (Taq polymerase) kua wehea mai i te huakita thermophilic Thermus aquaticus, tetahi o nga thermophiles tuatahi ka kitea.
Heoi, ehara i te mea ngawari te rangahau o nga thermophile, a, kaore e taea te hanga i tetahi taiwhanga koiora. Ina koa, kare e taea te kite i nga thermophile ora i roto i te vitro me tetahi karu karu rama paerewa, ahakoa me nga ruma whakamahana e waatea ana ki te hokohoko, ko te tikanga ka whakatauhia mo te pāmahana iti iho i te 40°C. Mai i te tekau tau atu i 1990, he torutoru noa nga roopu rangahau kua whakatapua ki te whakauru i nga punaha moroiti teitei (HTM). I te tau 1994 Glukh et al. I hangaia te ruma whakamahana/mao i runga i te whakamahinga o te peltier cell e whakahaere ana i te mahana o nga capillaries tapawhā katia kia mau tonu te anaerobicity 20 . Ka taea te whakamahana i te taputapu ki te 100 °C i te tere o te 2 °C/s, ka taea e nga kaituhi te ako i te motireti o te huakita hyperthermophilic Thermotoga maritima21. I te tau 1999 Horn et al. Kua whakawhanakehia he taputapu tino rite, i runga tonu i te whakamahinga o nga capillaries whakawera e tika ana mo te miihini arumoni ki te ako i te wehenga/hononga pūtau. I muri i te wa roa o te kore mahi, i timata ano te rapu mo nga HTM whai hua i te tau 2012, ina koa mo te raupapa pepa a te roopu Wirth i whakamahi i tetahi taputapu i hangaia e Horn et al. Tekau ma rima tau ki muri, i akohia te motiness o te maha o nga archaea, tae atu ki te hyperthermophiles, i te mahana ki te 100°C ma te whakamahi i nga capillaries whakawera23,24. I whakarereketia ano e ratou te karu karu taketake kia tere ake te whakamahana (he maha nga meneti hei utu mo te 35 meneti kia eke ki te paemahana kua whakaritea) me te eke i te rōnaki pāmahana raina neke atu i te 2 cm puta noa i te reo. Kua whakamahia tenei taputapu hanga rōnaki pāmahana (TGFD) ki te ako i te nekenekehanga o te maha o nga thermophiles i roto i nga rōnaki pāmahana i nga tawhiti whai take koiora 24, 25 .
Ko te whakamahana i nga capillaries kati ehara i te mea anake te huarahi ki te kite i nga thermophile ora. In 2012, Kuwabara et al. I whakamahia nga ruuma Pyrex tuku i te kainga kua hiritia ki te whakapiri wera-wera (Super X2; Cemedine, Japan). I whakanohoia nga tauira ki runga i te pereti whakamahana maramara e waatea ana ki te hokohoko (Micro Heat Plate, Kitazato Corporation, Japan) ka taea te whakamahana ki te 110°C, engari kaore i te whakaaro tuatahi mo te whakaahua koiora. I kite nga kaituhi i te wehewehenga pai o nga huakita thermophilic anaerobic (Thermosipho globiformans, te wa rearua 24 min) i te 65°C. I te 2020, Pulshen et al. Ko te whakamahana pai o nga rihi whakarewa arumoni (AttofluorTM, Thermofisher) i whakaatuhia ma te whakamahi i nga huānga whakamahana whare e rua: he taupoki me te atamira (te whirihoranga a te miihini PCR). Ko tenei hononga ka puta he riterite te pāmahana wē me te aukati i te whakaetonga me te tōhau kei raro o te taupoki. Ko te whakamahi i te O-mowhiti ka karo i te whakawhiti hau me te taiao. Ko tenei HTM, e kiia ana ko te Sulfoscope, i whakamahia hei whakaahua i te Sulfolobus acidocaldarius i te 75°C27.
Ko te herenga o enei punaha katoa ko te herenga ki te whakamahi i nga whaainga hau, ko te rumaki hinu karekau e pai mo te teitei o te pāmahana me te whakaahua ma roto i nga tauira maramara >1-mm te matotoru. Ko te herenga o enei punaha katoa ko te herenga ki te whakamahi i nga whaainga hau, ko te rumaki hinu karekau e pai mo te teitei o te pāmahana me te whakaahua ma roto i nga tauira maramara >1-mm te matotoru. Общепризнанным недостатком всех этих систем было ограничение на использование воздушных объективов, посколюмбужов ение в масло не подходило для такой высокой температуры и для визуализации через прозрачные образцы толщ1инмой. Ko te ngoikoretanga o enei punaha katoa ko te herenga ki te whakamahi i nga whaainga hau, i te mea kaore i pai te rumaki hinu mo te teitei o te pāmahana me te tirohanga ma nga tauira maramara > 1 mm te matotoru.所有这些系统的一个公认限制是限制使用空气物镜，任何油浸都不适合这是样的1合这样的合这样厚的透明样品成像。 Ko te whakawhäititanga o enei pünaha katoa ko te whakawhäititanga o te whakamahi whakaata i roto i te hau, i te mea karekau e tika te rumaki hinu mo te atahanga tauira maramara >1 mm te matotoru i te nui o te mahana. Общепризнанным недостатком всех этих систем является ограниченное использование воздушных объективов, лимубово масло непригодно для таких высоких температур и визуализации через прозрачные образцы толщиной >1 мм. Ko te ngoikoretanga o enei punaha katoa ko te iti o te whakamahi i nga arotahi hau, ko te rumaki hinu karekau e pai mo nga pāmahana teitei me te tirohanga ma nga tauira maramara >1 mm te matotoru.No na tata nei, i hikitia tenei here e Charles-Orzag et al. 28, nana i hanga he taputapu kare ake te wera i te taha o te punaha, engari ko roto tonu i te karaihe uhi, he mea hipoki ki te paparanga maramara angiangi o te parenga i hangaia ki te ITO (indium-tin oxide). Ka taea te whakamahana i te taupoki ki te 75 °C ma te tuku i te iahiko hiko i roto i te paparanga maramara. Engari, me whakamahana ano te kaituhi i te arotahi ki te kaupapa, engari kaua e neke ake i te 65 °C, kia kore ai e kino.
Ko enei mahi e whakaatu ana ko te whakawhanaketanga o te miihini whakaata teitei-nui kaore i te whakamahia whanuitia, he maha nga wa e hiahiatia ana he taputapu whare, a ka tutuki i te utu mo te whakatau mokowhiti, he tino kino tenei na te mea ko nga microorganisms thermophilic kaore i nui ake i etahi. micrometers. Ko te iti o te whakamahana te mea matua ki te whakaoti rapanga e toru o te HTM: he iti te taumira mokowā, he nui te waiariki i te wa e wera ana te punaha, me te whakamahana kino o nga huānga a tawhio noa (hinu rumaki, arotahi whainga... ringa o te kaiwhakamahi) i te tino wera. ).
I roto i tenei pepa, ka whakauruhia e matou he HTM mo te tirohanga thermophile kaore i runga i te whakamahana parenga. Engari, i tutuki i a maatau te whakamahana o te rohe i roto i te rohe iti o te tirohanga a te karu ma te whakamaarama taiaho o te taputapu whakauru marama. I whakaatahia te tohatoha o te pāmahana ma te whakamahi i te karuiti ine ine (QPM). Ko te whai huatanga o tenei tikanga e whakaatuhia ana e Geobacillus stearothermophilus, he huakita thermophilic motile e whakaputa uri ana i te 65°C me te wa poto poto (tata ki te 20 meneti), me te Sulfolobus shibatae, he hyperthermophile e tipu pai ana i te 80°C (archaea) hei whakaatu. Ko te tere o te tukurua me te kauhoe i kitea he mahi o te pāmahana. Ko tenei laser HTM (LA-HTM) kaore i te whakaitihia e te matotoru o te hipoki hipoki, i te ahua ranei o te kaupapa (te hau, te rumaki hinu ranei). Ma tenei ka taea te whakamahi i tetahi arotahi taumira teitei i runga i te maakete. Kare hoki e mamae i te puhoi o te whakamahana na te koretake o te waiariki (ka eke ki te whakamahana inamata i runga i te tauine mira) me te whakamahi i nga waahanga hokohoko anake. Ko nga awangawanga haumaru hou anake e pa ana ki te noho mai o nga kurupae laser kaha (te nuinga ki te 100 mW) i roto i te taputapu me te mea pea ma nga kanohi, e hiahia ana kia mau motiuri whakamarumaru.
Ko te kaupapa o LA-HTM ko te whakamahi i te taiaho hei whakamahana i te tauira i te rohe i roto i te tirohanga o te karu (Fig. 1a). Ki te mahi i tenei, me maama te tauira. Ki te whakamahi i te mana laser whaitake (iti iho i te 100 mW), kaore matou i whakawhirinaki ki te whakauru o te marama e te reo wai, engari i whakanui ake i te whakauru o te tauira ma te whakakikorua i te taputapu ki nga nanoparticles koura (Fig. 1c). Ko te whakawera i nga maara nano koura me te maama he mea nui ki te waahi o te plasmonics waiariki, me nga tono e tumanakohia ana i roto i te biomedicine, te nanochemistry me te hauhake o te ra29,30,31. I nga tau kua pahure ake nei, kua whakamahia e matou tenei LA-HTM i roto i nga rangahau maha e pa ana ki nga tono plasma waiariki i roto i te ahupūngao, te matū me te koiora. Ko te tino uaua o tenei tikanga ko te whakaatu i te tohu paemahana whakamutunga, i te mea he iti te pāmahana teitei ki te rohe microscale i roto i te tauira. Kua whakaatuhia e matou ka taea te whakatutuki i te whakamaaramatanga o te pāmahana ma te wha-wavelength transverse shear interferometer, he tikanga ngawari, teitei-taumira, me te tino tairongo o te miihini ine ine i runga i te whakamahi i nga pae kutikuti rereke-rua (e mohiotia ana ano he kupenga ripeka). 33,34,35,36. Ko te pono o tenei tikanga moroiti waiariki, i runga i te karu ngaru o mua (CGM), kua whakaatuhia i roto i nga pepa tatini i whakaputaina i roto i nga tau tekau kua hipa37,38,39,40,41,42,43.
Te kaupapa o te whakaurunga o te whakamahana taiaho whakarara, te hanga me te karuiti pāmahana. b Tauira āhuahanga kei roto i te rūma AttofluorTM kei roto he uhi uhi kua whakakikoruatia ki nga matūriki nano koura. c Titiro tata ki te tauira (kaua e tauine). d e tohu ana i te ahua o te ahua o te kurupae laser me te (e) te tohatoha pāmahana whai muri mai i runga i te tauira rererangi o nga matūriki koura koura. Ko te f he kotaha kurupae taiaho annular e tika ana mo te whakaputa i te pāmahana rite e whakaatuhia ana i roto i te whaihanga o te tohatoha pāmahana hua e whakaatuhia ana i te (g). Pae tauine: 30 µm.
Otirā, inā tata nei i tutuki i a mātou te whakawera o ngā pūtau whakangote me te LA-HTM me te CGM me te whai i nga urupare ohorere wera pūtau i roto i te awhe o te 37-42°C, e whakaatu ana i te whaihuatanga o tenei tikanga ki te atahanga pūtau ora kotahi. Heoi ano, ko te tono a LA-HTM ki te ako i nga microorganisms i te teitei o te pāmahana ehara i te mea tino marama, na te mea ka nui ake te tupato ki te whakataurite ki nga pūtau mammalian: tuatahi, ko te whakamahana i te raro o te reo ma te tekau nga nekehanga (kaore i te iti o nga nekehanga) ka arahi. ki te rōnaki pāmahana poutū kaha. ka taea te hanga i te korikori wē 44, ki te kore e piri ki te tïpako, ka puta kino te neke me te ranu huakita. Ka taea te whakakore i tenei whakawhitinga ma te whakaiti i te matotoru o te paparanga wai. Mo tenei kaupapa, i roto i nga whakamatautau katoa e whakaatuhia ana i raro iho nei, i tuuhia nga whakatārewatanga huakita ki waenga i nga uhi uhi e rua tata ki te 15 µm te matotoru ka whakatakotoria ki roto i te kapu whakarewa (AttofluorTM, Thermofisher, Fig. 1b,c). I roto i te parau tumu, ka taea te karo i te convection ki te he iti te matotoru o te wai i te rahi kurupae o te taiaho whakawera. Tuarua, ko te mahi i roto i te ahuahanga iti ka taea te whakapouri i nga rauropi aerobic (tirohia te Whakaahua S2). Ka taea te karo i tenei raruraru ma te whakamahi i te tïpako e uru ana ki te hāora (tetahi atu hau tino nui ranei), ma te waiho i nga mirumiru hau kua mau ki roto i te uhi hipoki, ma te keri rua ranei ki te uhi hipoki o runga (tirohia te Whakaahua S1) 45 . I roto i tenei rangahau, i whiriwhiria e matou te otinga whakamutunga (Whakaahua 1b me S1). Ka mutu, karekau te whakawera taiaho e whakarato i te tohatoha pāmahana rite. Ahakoa he rite te kaha o te kurupae laser (Fig. 1d), kaore i te rite te tohatoha o te pāmahana, engari he rite tonu ki te tohatoha Gaussian na te whakamaarama wera (Fig. 1e). I te mea ko te whainga ki te whakarite i nga pāmahana tika i roto i te tirohanga mo te ako i nga punaha koiora, kaore i te pai nga whakaahua koretake, ka taea hoki te neke i nga huakita thermophoretic ki te kore e piri ki te tïpako (tirohia te Whakaahua S3, S4)39. Ki tenei mutunga, i whakamahia e matou he modulator marama mokowā (SLM) ki te hanga i te kurupae taiaho pōkākā kia rite ki te ahua o te mowhiti (Fig. 1f) i roto i te rererangi o te tauira ki te whakatutuki i te tohatoha pāmahana tino rite i roto i te rohe āhuahanga homai, ahakoa te werawera (Fig. 1d) 39 , 42, 46. Whakanohoia he uhi o runga ki runga i te rihi whakarewa (Whakaahua 1b) kia kore ai te whakaetonga o te reo me te titiro mo etahi ra. Na te mea karekau i hirihia tenei peepi o runga, ka ngawari te taapiri atu i nga wa katoa mena e tika ana.
Hei whakaatu me pehea te mahi a LA-HTM me te whakaatu i tona whaihuatanga i roto i te rangahau thermophilic, i akohia e matou te huakita aerobic Geobacillus stearothermophilus, he pai te pāmahana tipu o te 60-65°C. Kei te huakita ano he haki me te kaha ki te kauhoe, he tohu ano mo te mahi pūkoro noa.
Ko nga tauira (Fig. 1b) i whakauruhia i mua i te 60 ° C mo te haora kotahi, ka tukuna ki roto i te kaipupuri tauira LA-HTM. E rua nga take i mua i te whakamohoatanga, engari e rua nga take: Tuatahi, ka whakakāhia te laser, ka tipu tonu nga pūtau me te wehewehe (tirohia te kiriata M1 i roto i nga Rauemi Tāpiri). Ki te kore he whakamohoatanga i mua, ka whakaroa te tipu huakita mo te 40 meneti ia wa ka whakamahana te waahi tirohanga hou ki te tauira. Tuarua, ko te 1 haora i mua i te whakawhanaungatanga i whakatairanga i te piri o nga huakita ki te uhi hipoki, e kore ai e paheke nga pūtau i waho o te tirohanga na te thermophoresis i te wa i kaina ai te taiaho (tirohia te kiriata M2 i nga Rauemi Tāpiri). Ko te Thermophoresis te neke o nga matūriki, ngota ngota ranei i runga i te rōnaki pāmahana, i te nuinga o te wā mai i te wera ki te makariri, ā, ko te huakita ehara i te mea rereke43,47. Ka whakakorehia tenei paanga kino ki runga i tetahi waahi ma te whakamahi i te SLM hei hanga i te kurupae laser me te whakatutuki i te tohatoha pāmahana papatahi.
I te piki. Ko te ahua 2 e whakaatu ana i te tohatoha pāmahana i inehia e te CGM i riro mai ma te whakamaarama i tetahi taputapu karaihe kua whakakikoruatia ki nga matūriki nano koura me te kurupae laser annular (Fig. 1f). I kitea he tohatoha pāmahana papatahi ki runga i te waahi katoa e hipokina ana e te kurupae laser. I whakaritea tenei rohe ki te 65°C, te pāmahana tino pai o te tipu. I waho atu o tenei rohe, ka taka noa te piunga mahana ki te \(1/r\) (kei te \(r\) te taunga irirangi).
he mapi Pawera o nga inenga CGM ka whiwhi ma te whakamahi i te kurupae laser annular ki te whakaraerae i tetahi paparanga nano matūriki koura ki te whiwhi i te tohu pāmahana papatahi ki runga i te waahi porohita. b Wehenga o te mapi mahana (a). Ko te ahua o te kurupae laser e tohuhia ana e te porowhita iraira hina. I tuaruatia te whakamatautau (tirohia nga Rauemi Tāpiri, Whakaahua S4).
I aroturukihia te oranga o nga pūtau huakita mo etahi haora ma te whakamahi i te LA-HTM. I te piki. Ko te 3 e whakaatu ana i te wa mo nga whakaahua e wha i tangohia mai i te kiriata 3 haora 20 meneti (Waiata M3, Nga korero taapiri). I kitea nga huakita ki te tipu kaha i roto i te waahi porowhita kua tautuhia e te laser i reira te pāmahana tino pai, tata ki te 65°C. Engari, i tino heke te tipu o nga pūtau i te hekenga o te mahana ki raro i te 50°C mo te 10 hēkona.
Ko nga whakaahua hohonu o nga huakita G. stearothermophilus e tipu ana i muri i te whakamahana laser i nga waa rereke, (a) t = 0 min, (b) 1 h 10 min, (c) 2 h 20 min, (d) 3 h 20 min, i waho o 200 I tangohia mai i te kiriata kotahi meneti te roa (he kiriata M3 kei roto i nga korero taapiri) kua whakakikoruatia ki runga i te mapi pāmahana e rite ana. Ka huri te taiaho i te wa \(t=0\). Kua taapirihia nga hauwhaariki ki te ahua kaha.
Hei tatau ake i te tipu o nga pūtau me tona ti'aturi ki te mahana, i inehia e matou te pikinga o te koiora o nga momo koroni o nga huakita kua wehea tuatahi i roto i te tirohanga Whitiāhua M3 (Fig. 4). Ko nga huakita matua i kowhiria i te timatanga o te hanganga o te waeine hanga koroni paku (mCFU) e whakaatuhia ana i te Whakaahua S6. I tangohia te inenga papatipu maroke ki te kamera CGM 48 i whakamahia hei mahere i te tohatoha pāmahana. Ko te kaha o te CGM ki te ine i te taumaha maroke me te pāmahana ko te kaha o te LA-HTM. Ka rite ki te whakaaro, ka tere ake te tipu o te huakita i te teitei o te pāmahana (Fig. 4a). E whakaatu ana i roto i te maataki haurua-rau i te Whakaahua 4b, ko te tipu i nga mahana katoa e whai ana i te tipu taupūtanga, i reira ka whakamahia e te raraunga te mahi taupū \(m={m}_{0}{10}^{t/\ tau }+ {{ \mbox{cst}}}\), kei hea \(\tau {{{{{\rm{log }}}}}}}2\) – te wa whakatipuranga (te wa rearua ranei), \( g =1/ \tau\) – tere tipu (te maha o nga wehewehenga mo ia waeine wa ). I te piki. Ko te 4c e whakaatu ana i te reiti tipu me te wa whakatipuranga hei mahi o te pāmahana. Ko nga mCFU te tipu tere e tohuhia ana e te haaputanga o te tipu i muri i nga haora e rua, he whanonga e tumanakohia ana na te nui o te kiato huakita (he rite ki te wahanga tu i roto i nga ahurea wai puāwaitanga). Ko te ahua whanui \(g\maui(T\matau)\) (Whakaahua 4c) e rite ana ki te anau-waahanga-rua e tumanakohia ana mo G. stearothermophilus me te reeti tipu tino pai ki te 60-65°C. Whakatauritehia nga raraunga ma te whakamahi i te tauira katinara (Whakaahua S5)49 kei hea \(\maui({{G}_{0}{;\;T}}_{{\min }};{T}_{{opt} } ;{T}_{{\max}}\right)\) = (0.70 ± 0.2; 40 ± 4; 65 ± 1.6; 67 ± 3) °C, e pai ana ki etahi atu uara kua whakahuahia i roto i nga tuhinga49. Ahakoa ka taea te whakaputa i nga tawhā e whakawhirinaki ana ki te pāmahana, ka rereke pea te reeti tipu morahi o \({G}_{0}\) mai i tetahi whakamatautau ki tetahi atu (tirohia nga whika S7-S9 me te kiriata M4). He rereke ki nga tawhā whakamaarama, me noho mo te ao katoa, ko te tere o te tipu ka whakawhirinaki ki nga ahuatanga o te reo (te waatea o nga matūkai, te kukū hāora) i roto i te ahuahanga microscale kua kitea.
he tipu moroiti ki nga momo pāmahana. mCFU: Nga Waehanga Hangahanga Koroni Iti. Raraunga i whiwhi mai i te ataata o te huakita kotahi e tipu ana i te rōnaki pāmahana (kiriata M3). b He rite tonu ki te (a), tauine haurua. c Reanga tipu\(\tau\) me te wa whakangao\(g\) i tatauhia mai i te whakahekenga rarangi (b). Paepae hapa whakapae: awhe pāmahana i toro atu ai nga mCFU ki te waahi tirohanga i te wa e tipu ana. Paepae hapa poutū: hapa paerewa regression raina.
I tua atu i te tipu noa, i etahi wa ka maanu etahi huakita i te wa whakamahana laser, he whanonga e tumanakohia ana mo nga huakita whai haki. Ko te kiriata M5 i roto i nga korero taapiri e whakaatu ana i enei mahi kauhoe. I roto i tenei whakamatautau, i whakamahia te iraruke taiaho rite ki te hanga i te rōnaki pāmahana, penei i te Whakaaturanga 1d, e me te S3. Ko te Whakaahua 5 e whakaatu ana i nga raupapa atahanga e rua i kowhiria mai i te kiriata M5 e whakaatu ana ko tetahi huakita e whakaatu ana i te neke aronga, ka noho kore nga huakita katoa.
Ko nga papa wa e rua (a) me (b) e whakaatu ana i te kauhoe o nga huakita rereke e rua kua tohua ki te porowhita iraira. Ko nga whakaahua i tangohia mai i te kiriata M5 (kua whakaratohia hei rauemi taapiri).
I roto i te take o G. stearothermophilus, i timata te nekehanga kaha o te huakita (Fig. 5) i etahi hēkona i muri i te whakakā o te kurupae laser. Ko tenei tirohanga e whakanui ana i te urupare-a-tinana o tenei microorganism thermophilic ki te pikinga o te pāmahana, pera i kitehia e Mora et al. 24 . Ko te kaupapa mo te motireti huakita tae noa ki te thermotaxis ka taea te tuhura ma te whakamahi i te LA-HTM.
Ko te kauhoe moroiti kia kaua e rangirua ki etahi atu momo nekehanga a tinana, ara (i) Ko te nekehanga Paraone, he ahua rawe te ahua me te kore he aronga tuturu, (ii) te korikori 50 me te thermophoresis 43, kei roto i te nekehanga o te nekehanga i runga i te pāmahana. rōnaki.
E mohiotia ana a G. stearothermophilus mo tona kaha ki te whakaputa i nga puaa tino aatete (te hanga spore) ina pa ana ki nga ahuatanga kino o te taiao hei parenga. Ka pai ano nga ahuatanga o te taiao, ka tipu nga pua, ka hanga i nga pūtau ora, ka tipu ano. Ahakoa e tino mohiotia ana tenei tukanga sporulation/germination, kare ano i kitea i te waa tuturu. Ma te whakamahi i te LA-HTM, ka ripoatahia e matou i konei te kitenga tuatahi o nga mahi whakatipu i G. stearothermophilus.
I te piki. Ko te 6a e whakaatu ana i nga whakaahua o te hohonutanga whatu (OT) i whiwhi ma te whakamahi i te huinga CGM o te 13 puaa. Mo te wa kohinga katoa (15 h 6 min, \(t=0\) – te timatanga o te whakamahana laser), 4 o te 13 puaa i tipu, i nga wa whai muri \(t=2\) h, \( 3\ ) h \(10 \)', \(9\) h \(40\)' me \(11\) h \(30\)'. Ahakoa ko tetahi o enei huihuinga e whakaatuhia ana i te Whakaahua 6, e 4 nga huihuinga germination ka kitea i roto i te kiriata M6 i roto i nga rauemi taapiri. Ko te mea whakamiharo, he ahua matapōkere te ahua o te whakatipu: kaore nga puaa katoa e tipu ana, kaore hoki e tipu i te wa kotahi, ahakoa he rereke nga ahuatanga o te taiao.
a Time-lapse e 8 nga whakaahua OT (te rumaki hinu, 60x, 1.25 NA te whaainga) me te (b) te whanaketanga koiora o G. stearothermophilus aggregates. c (b) Ka tuhia ki runga i te tauine-a-raupapa hei whakaatu i te rarangi o te reeti tipu (raina kua tohua).
I te piki. Ko te 6b,c e whakaatu ana i te koiora o nga taupori pūtau i te waahi tirohanga hei mahi o te wa i te wa katoa o te kohinga raraunga. Ko te pirau tere o te papatipu maroke ka kitea i te \(t=5\)h i te piki. 6b, c, nā te putanga o ētahi pūtau mai i te āpure tirohanga. Ko te tere tipu o enei huihuinga e wha ko \(0.77\pm 0.1\) h-1. He teitei ake tenei uara i te tere tipu e pa ana ki te Whakaahua 3. 3 me te 4, kei reira nga pūtau ka tipu noa. Ko te take i piki ake ai te tipu o te G. stearothermophilus mai i nga puaa kaore i te marama, engari ko enei inenga e whakaatu ana i te hiahia o te LA-HTM me te mahi i te taumata o te pūtau kotahi (i te taumata mCFU kotahi ranei) ki te ako atu mo te hihiri o te oranga o te pūtau. .
Hei whakaatu ake i te kaha o te LA-HTM me ana mahi i nga wera nui, i tirohia e matou te tipu o te Sulfolobus shibatae, he hyperthermophilic acidophilic archaea me te pāmahana tino pai o te 80°C51. Ina whakaritea ki a G. stearothermophilus, he rereke ano te ahua o enei archaea, he rite ki te 1 micron spheres (cocci) kaua ki nga rakau roa (bacilli).
Ko te ahua 7a ko nga whakaahua hohonu whatu raupapa o S. shibate mCFU i whiwhi ma te whakamahi i te CGM (tirohia te kiriata ahua M7 i nga Rauemi Tāpiri). Ka tipu tenei mCFU ki te 73°C, i raro iho i te pāmahana tino pai o te 80°C, engari i roto i te awhe pāmahana mo te tipu kaha. I kite matou i te maha o nga mahi wehewehenga ka rite te ahua o nga mCFU ki nga micrograpes o archaea i muri i etahi haora. Mai i enei whakaahua OT, i inehia te koiora mCFU i roto i te waa ka whakaatuhia ki te Whakaahua 7b. He mea whakamere, ko nga S. shibate mCFUs i whakaatu i te tipu raina engari i te tipu taupuke i kitea me G. stearothermophilus mCFUs. Kua roa te korero 52 mo te ahua o te reiti tipu o nga pūtau: i te wa e whakaatu ana etahi rangahau i nga reiti tipu o nga moroiti e rite ana ki te rahi (te tipu tauputanga), ko etahi e whakaatu ana i te tere tonu (te tipu raina, rua ranei). E ai ki nga korero a Tzur et al.53, ko te wehewehe i waenga i te tipu taupū me te (bi) raina me te tika o te <6% i roto i nga inenga koiora, kaore e taea e te nuinga o nga tikanga QPM, tae noa ki te whakauru i te interferometry. E ai ki nga korero a Tzur et al.53, ko te wehewehe i waenga i te tipu taupū me te (bi) raina me te tika o te <6% i roto i nga inenga koiora, kaore e taea e te nuinga o nga tikanga QPM, tae noa ki te whakauru i te interferometry. Как объяснили Цур и др.53, различение экспоненциального и (би)линейного роста требует точности <6% в избеиостих для большинства методов QPM, даже с использованием интерферометрии. I whakamaramahia e Zur et al.53, ko te wehewehe i waenga i te tipu taupū me te (bi) raina e hiahia ana <6% tika i roto i nga inenga koiora, kaore e taea mo te nuinga o nga tikanga QPM, ahakoa te whakamahi i te interferometry.I whakamaramahia e Zur et al. 53, ko te wehewehe i waenga i te tipu taupū me te (bi) raina me iti iho i te 6% te tika i roto i nga inenga koiora, kaore e taea mo te nuinga o nga tikanga QPM, ahakoa ka whakamahia te interferometry. Ka whakatutukihia e CGM tenei tika me te tika iti-pg i roto i nga inenga koiora36,48.
he Waa-roa e 6 nga whakaahua OT (te rumaki hinu, 60x, te whaainga NA 1.25) me te (b) te whanaketanga koiora moroiti-CFU i ine ki te CGM. Tirohia te kiriata M7 mo etahi atu korero.
Ko te tipu o te S. shibate he mea ohorere, kaore ano kia korerotia. Heoi ano, e tika ana kia tipu ake te tipu, na te mea ka roa te wa, me puta nga wehenga maha o te 2, 4, 8, 16 … nga pūtau. I whakapae matou ko te tipu o te raina na te aukati o te pūtau na te whakakao pūtau mātotoru, pera i te puhoi haere o te tipu o te pūtau ka tae ki te noho moe ina he tiketike rawa te kiato pūtau.
Ka mutu taatau ma te matapaki i nga waahanga e rima e whai ake nei: te whakaheke i te rōrahi whakamahana, te whakahekenga o te waiariki inertia, te hiahia ki nga nanoparticles koura, te hiahia ki te microscopy wahanga ine, me te awhe pāmahana pea ka taea te whakamahi LA-HTM.
Ka whakatauritea ki te whakamahana whakawera, he maha nga painga o te whakamahana laser e whakamahia ana mo te whanaketanga HTM, e whakaatu ana i tenei rangahau. Otirā, i roto i te pāpāho wai i roto i te mara o te tirohanga o te microscope, te rōrahi whakawera te pupuri i roto i te torutoru (10 μm) 3 pukapuka. Ma tenei ara, ko nga moroiti kua kitea anake e kaha ana, ko etahi atu huakita e moe ana ka taea te whakamahi ki te ako ano i te tauira - kaore he take ki te whakarereke i te tauira i nga wa katoa e tika ana kia tirohia te pāmahana hou. I tua atu, ka taea e te whakamahana microscale te tirotiro tika i te maha o nga pāmahana: I whiwhi te Whakaahua 4c mai i te kiriata 3-haora (Movie M3), me te whakarite me te tirotiro i etahi tauira - kotahi mo ia tauira e rangahaua ana. Ko te y te pāmahana e tohu ana i te maha o nga ra o te whakamatautau. Ko te whakaheke i te rōrahi whakamahana ka mau tonu nga waahanga whatu a tawhio noa o te microscope, ina koa ko te arotahi whainga, i te pāmahana rūma, he raru nui kei te aroaro o te hapori i tenei wa. Ka taea te whakamahi i te LA-HTM me tetahi arotahi, tae atu ki nga arotahi rumaki hinu, ka noho ki te pāmahana rūma ahakoa te wera nui o te tirohanga. Ko te herenga matua o te tikanga whakamahana taiaho e ripoatahia ana e matou i roto i tenei rangahau ko nga pūtau karekau e piri ana, karekau ranei e rewa ana kei tawhiti atu i te tirohanga me te uaua ki te ako. Ko te otinga ko te whakamahi i nga arotahi whakarahi iti kia nui ake te pikinga o te pāmahana neke atu i te rau microns. Ko tenei whakatupato ka haere tahi me te whakahekenga o te whakataunga mokowā, engari mena ko te whainga ko te ako i te nekehanga o nga microorganisms, kaore e hiahiatia he whakataunga mokowā teitei.
Ko te tauine wa mo te whakamahana (me te whakamatao) te punaha \({{{{{\rm{\tau }}}}}}}}}_{{{\mbox{D}}}}}\) kei runga i tona rahi , e ai ki te ture \({{{({\rm{\tau }}}}}}}}}_{{{\mbox{D}}}}={L}^{2}/D\), kei hea \ (L\ ) Ko te rahi o te ahua o te puna wera (ko te diameter o te kurupae laser i roto i ta maatau rangahau ko \(L\ mo te 100 \) μm), \(D \) ko te diffusivity waiariki o te taiao (toharite i to tatou te pouaka, te karaihe me te wai Te tere o te tohatoha\(D\ mo te 2\fold {10}^{-7}\) m2/s No reira, i roto i tenei rangahau, ko nga whakautu wa o te raupapa 50 ms, ara, quasi-instantaneous). Ko nga huringa o te pāmahana, ka taea te tumanako ka whakapotohia te roanga o te whakamatautau, engari ka taea ano te wa tika \(t=0\) mo nga rangahau hihiri o nga paanga pāmahana.
Ko ta matou tikanga e whakaarohia ana e pa ana ki tetahi taputapu whakauru marama (hei tauira, nga tauira arumoni me te paninga ITO). Heoi, ka taea e nga nanoparticles koura ki te whakarato i te kohinga teitei i roto i te infrared me te iti o te whakauru i roto i te awhe e kitea ana, ko nga ahuatanga o muri e whai hua ana mo te maataki whatu whai hua i roto i te awhe ka kitea, ina koa ka whakamahi i te rewharewha. I tua atu, ko te koura he biocompatible, he matū karekau, ka taea te whakarite kiato whatu mai i te 530 nm ki te infrared tata, a he ngawari, he ohaoha hoki te whakarite tauira29.
Ka taea e te mapi ngaru o mua (CGM) te whakamaarama i te pāmahana i te moroiti, engari me te aro turuki i te koiora, ka tino whai hua (mehemea kaore e tika) me te LA-HTM. I roto i nga tau tekau kua pahure ake nei, kua whakawhanakehia etahi atu tikanga moroiti pāmahana, ina koa i roto i te waahi o te whakaahua koiora, me te nuinga o enei me whakamahi i nga tirotiro hiko-a-mahana54,55. Heoi ano, kua whakahengia enei tikanga me etahi purongo kua ine i nga huringa pāmahana kore pono i roto i nga ruma, tera pea na te mea he maha nga mea e pa ana ki nga ahuatanga rereke i tua atu i te pāmahana. I tua atu, ko te nuinga o nga rangahau kareoro karekau e tau i te wera nui. No reira, ko te QPM me te CGM e tohu ana i tetahi tikanga moroiti pāmahana tino pai mo te ako i te oranga i nga pāmahana teitei ma te whakamahi i te karu whatu.
Ko nga rangahau mo te S. shibatae, e noho pai ana i te 80°C, e whakaatu ana ka taea te tono LA-HTM ki te ako i te hyperthermophiles, ehara i te thermophiles ngawari noa. Ko te tikanga, karekau he rohe ki te awhe o nga pāmahana ka taea te toro atu ma te whakamahi i te LA-HTM, a tae noa ki nga pāmahana i runga ake i te 100°C ka taea te eke ki te pehanga o te hau me te kore e koropupupuhia, pera i whakaatuhia e to matou roopu o 38 i roto i nga tono matū waiariki i te hau. pehanga A. Ka whakamahia he taiaho mo te whakamahana i nga maara nano koura 40 i te ara ano. No reira, ka taea e LA-HTM te whakamahi ki te maataki i nga hyperthermophile kaore ano i kitea i mua ake nei me te moroiti whakaata teitei taumira teitei i raro i nga tikanga paerewa (ara i raro i te ahotea o te taiao).
Ko nga whakamatautau katoa i mahia ma te whakamahi i te miihini karu, tae atu ki te whakamarama Köhler (me te LED, M625L3, Thorlabs, 700 mW), te kaipupuri tauira me te nekehanga xy a-ringa, nga whaainga (Olympus, 60x, 0.7 NA, rangi, LUCPlanFLN60X ranei 60x, 1.25 NA, Hinu. , UPLFLN60XOI), CGM kamera (QLSI cross grating, 39 µm pitch, 0.87 mm from Andor Zyla camera sensor) ki te whakarato i te kaha me te atahanga ngaru, me te kamera sCMOS (ORCA Flash 4.0 V3, 16-bit mode , mai i Hamamatsu) hei tuhi i te nga raraunga e whakaatuhia ana i te Whakaahua 5 (kauhoe huakita). Ko te wehenga kurupae dichroic he taha 749 nm BrightLine (Semrock, FF749-SDi01). Ko te tātari kei mua o te kaamera he 694 poto poto (FF02-694/SP-25, Semrock). Titanium sapphire laser (Laser Verdi G10, 532 nm, 10 W, pumped tsunami laser cavity, Spectra-Physics i te Fig. 2-5, ka whakakapia ano e te Millenia laser, Spectraphysics 10 W, te kohao Mira laser pumped, Coherent, mo te Fig. 2 -5). 6 me 7) kua whakaritea ki te roangaru \({{{({\rm{\lambda }}}}}}}=800\) nm, e rite ana ki te plasmon resonance spectrum o te koura nanoparticles. 1152 pika) i hokona mai i Meadowlark Optics I tatauhia nga hologram ma te whakamahi i te Gerchberg-Saxton algorithm i whakaahuahia i te hono 39.
Ko te miihini ngaru o mua (CGM) he tikanga karuiti whatu i runga i te whakakotahitanga o te kupenga rereke-rua (e mohiotia ana ko te kupenga whiti) i te tawhiti kotahi mirimita mai i te pukoro o te kamera. Ko te tauira tino noa o te CGM i whakamahia e matou i roto i tenei rangahau ka kiia ko te wha-wavelength transverse shift interferometer (QLSI), kei roto i te kupenga-whakawhiti he tauira papataki kaha/waahanga i whakaurua mai e Primot et al. i te tau 200034. Ko nga raina pae kupenga poutū me te whakapae ka waihanga i nga atarangi-rite ki te matiti i runga i te pukoro, ka taea te tukatuka i te wa tika kia puta te korikoritanga o te ngaru (he ahua ahua ranei) o te maramatanga maiki. Ina whakamahia i runga i te karu, ka taea e te kaamera CGM te whakaatu i te rereketanga o te ara whatu o tetahi mea atahanga, e mohiotia ana ko te hohonu whatu (OT), me te tairongo i runga i te raupapa nanometers36. I roto i nga inenga CGM, hei whakakore i nga hapa o nga waahanga whatu, kurupae ranei, me tango tetahi ahua OT tohutoro tuatahi me tango mai i nga whakaahua o muri mai.
I mahia te moroiti pāmahana ma te whakamahi i te kamera CGM i whakaahuatia i roto i te tohutoro. 32. Hei poto, ko te whakamahana i te wai ka huri i tana taupae whakaata, ka puta he awenga arotahi waiariki e whakakino ana i te kurupae maiki. Ka inehia e te CGM tenei paheketanga o te ngaru me te tukatuka ma te whakamahi i te algorithm deconvolution kia whiwhi ai i te tohatoha pāmahana e toru-ahu i roto i te reo wai. Mena ka tohatohahia nga nanoparticles koura puta noa i te tauira, ka taea te mahi mapi mahana ki nga waahi huakita-kore ki te whakaputa whakaahua pai ake, koinei te mahi i etahi wa. Ko te ahua CGM tohutoro i riro me te kore whakamahana (me te taiaho atu) ka mau i muri mai i te waahi ano o te ahua me te laser kei runga.
Ka whakatutukihia te inenga papatipu maroke ma te whakamahi i te kamera CGM i whakamahia mo te whakamaarama whakamahana. I whiwhihia nga whakaahua tohutoro CGM ma te neke tere i te tauira i roto i te x me te y i te wa e whakaatuhia ana hei tikanga mo te tauwaenga o te koretake i roto i te OT na te mea he huakita. Mai i nga whakaahua OT o te huakita, i whiwhihia o raatau koiora ma te whakamahi i te kohinga whakaahua i runga i nga waahi kua tohua ma te whakamahi i te algorithm wehewehenga kaainga a Matlab (tirohia te waahanga "Waehere Tau"), whai muri i nga tikanga i whakaahuahia i roto i te ref. 48. Hei poto, ka whakamahia te hononga \(m={\alpha}^{-1}\iint {{\mbox{OT}}}\left(x,y\right){{\mbox{d}} } x {{\mbox{d}}}}y\), ko \({{\mbox{OT}}}\maui(x,y\right)\) ko te atahanga hohonu whatu, ko \(m\) te taumaha maroke me te \({{{{\rm{\alpha }}}}}}}\) he taumau. I whiriwhiria e matou \({{{{\rm{\alpha))))))=0.18\) µm3/pg, he tau tonu mo nga ruma ora.
He pepa uhi 25 mm te whanui me te 150 µm te matotoru kua whakakikoruatia ki nga matūriki nano koura i tuu ki roto i te rūma AttofluorTM (Thermofisher) me te anga whakarunga nga matūriki nano koura. Ko Geobacillus stearothermophilus i whakatipuhia mo te po i roto i te reo LB (200 rpm, 60°C) i mua i ia ra o nga whakamatautau. Ko te maturuturunga iho o te 5 µl o te whakatārewatanga o G. stearothermophilus me te kiato whatu (OD) o 0.3 ki te 0.5 i whakatakotoria ki runga i te pepa uhi me nga matūriki nano koura. I muri iho, ka makahia he pepa porowhita 18 mm te whanui me te kohao 5 mm te whanui o te puku ki runga i te maturuturunga iho, me te 5 μl o te whakatārewatanga huakita me te kiato whatu rite tonu te tono ki te pokapū o te rua. Ko nga puna i runga i nga uhi hipoki i whakaritea i runga i nga tikanga i whakaahuahia i roto i te ref. 45 (tirohia nga korero taapiri mo etahi atu korero). Kātahi ka tāpirihia te 1 ml o te reo LB ki te uhi uhi kia kore ai e maroke te paparanga wai. Ko te uhi hipoki whakamutunga ka tuu ki runga i te taupoki kati o te ruuma Attofluor™ hei aukati i te whakaetonga o te reo i te wa o te heki. Mo nga whakamatautau whakatipu, i whakamahia e matou he pua, i muri i nga whakamatautau tikanga, i etahi wa ka hipokina te hipoki o runga. He rite tonu te mahi ki te tiki Sulfolobus shibatae. E toru nga ra (200 rpm, 75°C) o te maara tuatahi o Thiobacillus serrata i mahia i roto i te reo 182 (DSMZ).
Ko nga tauira o nga matūriki koura koura i whakaritea e te micellar block copolymer lithography. Ko tenei tukanga e whakaahuahia ana i roto i te Chap. 60. I te wa poto, i whakahiatotia nga micelles e kapi ana i nga katote koura ma te whakaranu i te copolymer ki te HAuCl4 ki te toluene. Ka rukuhia nga kapi kua horoia ki roto i te wairewa me te whakamaarama ki te whakamaarama UV i te aroaro o tetahi kaihoko whakaheke kia whiwhi kakano koura. Ka mutu, i whakatipuria nga kakano koura ma te whakapiri atu ki te uhi hipoki me te wairewa wai o KAuCl4 me te ethanolamine mo te 16 meneti, i puta mai he whakaritenga quasi-waa me te tino rite o nga nanoparticles koura kore-spherical i roto i te infrared tata.
Hei huri i nga interferograms ki nga whakaahua OT, i whakamahia e matou he algorithm a te kaainga, pera i nga korero i roto i te hono. 33 a e waatea ana hei kete Matlab i roto i te putunga a-iwi e whai ake nei: https://github.com/baffou/CGMprocess. Ka taea e te kete te tatau te kaha me nga whakaahua OT i runga i nga interferograms kua tuhia (tae atu ki nga whakaahua tohutoro) me nga tawhiti o te huinga kamera.
Hei tātai i te tauira wahanga i tukuna ki te SLM kia whiwhi tohu tohu pāmahana kua whakaritea, i whakamahia e matou he algorithm i hangaia i mua i te kaainga kaainga39,42 e waatea ana i roto i te putunga a-iwi e whai ake nei: https://github.com/baffou/SLM_temperatureShaping. Ko te whakaurunga ko te waahi pāmahana e hiahiatia ana, ka taea te tautuhi ma te mamati, ma te whakaahua bmp monochrome ranei.
Hei wehewehe i nga pūtau me te ine i o raatau taumaha maroke, i whakamahia e matou ta maatau Matlab algorithm i whakaputaina i roto i te putunga whanui e whai ake nei: https://github.com/baffou/CGM_magicWandSegmentation. I runga i ia ahua, me paato te kaiwhakamahi ki te huakita me te mCFU o te hiahia, whakatikahia te aro o te wand, me te whakaū i te kowhiringa.
Mo te roanga atu o nga korero mo te hoahoa ako, tirohia te Ripoata Rangahau Taiao e hono ana ki tenei tuhinga.
Ko nga raraunga e tautoko ana i nga hua o tenei rangahau e waatea ana mai i nga kaituhi i runga i te tono tika.
Ko te waehere puna e whakamahia ana i roto i tenei rangahau he taipitopito i roto i te waahanga Tikanga, a ka taea te tango i nga putanga patuiro mai i https://github.com/baffou/ i roto i nga waahi e whai ake nei: SLM_temperatureShaping, CGMprocess, me CGM_magicWandSegmentation.
Mehta, R., Singhal, P., Singh, H., Damle, D. & Sharma, AK Insight into thermophiles and their wide-spectrum applications. Mehta, R., Singhal, P., Singh, H., Damle, D. & Sharma, AK Insight into thermophiles and their wide-spectrum applications.Mehta, R., Singhal, P., Singh, H., Damle, D. and Sharma, AK Overview of thermophiles and their wide application. Mehta, R., Singhal, P., Singh, H., Damle, D. & Sharma, AK 深入了解嗜热菌及其广谱应用。 Mehta, R., Singhal, P., Singh, H., Damle, D. & Sharma, AK.Mehta R., Singhal P., Singh H., Damle D. me Sharma AK He tino mohio ki nga thermophiles me te whānuitanga o nga tono.3 Biotechnology 6, 81 (2016).
Wā whakairinga: Sep-26-2022